Participación del canal iónico de potasio task-3 en la sensibilidad a fríoestudio de su expresión y función en neuronas sensoriales primarias que expresan el canal iónico trpm8

Résumé

Las neuronas sensoriales primarias son muy diversas, tanto desde el punto de vista morfológico como funcional. Habitualmente, la identificación funcional de cada subpoblación de estas neuronas se ha basado en su patrón de respuesta a la aplicación de una batería de estímulos, tanto físicos como químicos, o bien por medio de técnicas inmunohistoquímicas. Estos métodos para identificar subpoblaciones específicas de neuronas sensoriales presenta limitaciones cuando se estudian los termorreceptores de frío, ya que estos representan una pequeña subpoblación del total, lo que añade una dificultad más a su caracterización bioquímica y funcional. TRPM8, un canal iónico TRP activado por el frío y el mentol se expresa en aproximadamente un 5-10% de todas las neuronas sensoriales, tanto en cultivo como en cortes histológicos. Para facilitar la caracterización de neuronas que expresan el canal TRPM8 se usó una línea de ratón transgénico que expresa la proteína fluorescente amarilla intensificada (eYFP) bajo el control del promotor de TRPM8 (TRPM8eYFP). Además, se desarrolló un método simple para purificar y caracterizar dichas neuronas fluorescentes mediante la técnica de FACS. Este método, combinado con el análisis de expresión génica, estudios electrofisiológicos y farmacológicos reveló que TASK-3, un canal de potasio de fuga, está presente en neuronas que expresan TRPM8, donde parece jugar un papel importante en la excitabilidad de dichas neuronas ante estímulos sensoriales. El abordaje experimental aquí descrito, abre posibilidades interesantes para una caracterización molecular detallada de los termorreceptores de frío que expresan el canal TRPM8, así como para cualquier otra clase de población de neuronas sensoriales susceptible de ser identificada con marcadores fluorescentes.