Análisis del perfil de microRNA en la eliminación de los progenitores esqueléticos de los espacios interdigitales embrionarios

Resumen

La secuenciación masiva de RNA de pequeño tamaño, en combinación con diversos análisis por qPCR, pusieron de manifiesto la implicación de los microRNA en la regulación de los eventos que conducen a la regresión del tejido presente en el espacio interdigital, en los autopodios de los embriones de pollo. Los microRNA fueron originalmente descubiertos en Caenorhabditis elegans, estos se encuentran presentes en la mayoría de los eucariotas, incluidos los seres humanos; Los microRNA son moléculas de ARN no codificantes y altamente conservadas entre especies. Están implicados en la regulación de la expresión génica. Se estima que los microRNA suponen entre el 1-5% del genoma humano y pueden llegar a regular al menos el 30% de los genes. los microRNA maduroS se generan a partir del procesamiento, en dos etapas, del microRNA primario (pri-miRNA), que se incorpora al complejo inductor de silenciamiento (RISC). Los microRNA maduros reconocen sus mRNA para la represión de su traducción y regular así negativamente la expresión génica. Durante el periodo de remodelación tisular se detectaron, en el tejido presente en el espacio interdigital, a partir de la secuenciación masiva, un total de 612 secuencias de microRNA de pollo (gga-miRNAs) ya conocidos, y 401 secuencias no identificadas. Treinta y seis microRNA, representados por más de 750 lecturas por millón, mostraron expresión diferencial entre las etapas 29HH (6 id periodo ) y 32HH (7,5 id ), que corresponden al inicio y al pico de la muerte celular interdigital. Veinte microRNA aumentaron su nivel de expresión por lo menos 1,5 veces, y 16 disminuyeron su nivel de expresión por lo menos 0,5 veces. Entre los microRNA que aumentaron su nivel de expresión encontramos microARN con reconocidas funciones proapoptóticas en otros sistemas (miR-181 familia, miR-451 y miR-148a), microRNA asociados a nflamación y a senescencia celular (miR-21 y miR-146) y microRNA capaces de inducir cambios en el Matriz extracelular (miR-30c). En contraste, los microRNA con efectos antiapoptóticos demostrados en otros sistemas, como miR-222 y miR-205, disminuían su nivel de expresión. Además, miR-92, un importante regulador positivo de la proliferación celular, también disminuyó su nivel de expresión. En conjunto, estos hallazgos indican un papel positivo de los miARN en el control de la regresión tisular y la muerte celular durante el proceso de regresión tisular que se produce en el espacio interdigital, uno de los ejemplos más característicos de muerte celular programada que se produce durante la etapa embrionaria.