Tipificación de cepas de brucella

Abstract

Brucella es un género de bacterias Gram-negativas, intracelulares facultativas que infectan un gran número de aimales incluyendo al hombre. Está compuesto por seis especies: Brucella abortus, B. Melitensis, B. Suis, B. Ovis, B. Canis y B. Neotomae, de acuerdo con diferencias en patogenicidad y la preferencia por el huésped. La distinción entre especies y biovares se lleva a cabo mediante pruebas diferenciales basadas en caracterización fenotípica. Los métodos de tipificación para la diferenciación de cepas de Brucella han mejorado en esta última década, debido fundamentalmente a la introducción de la tecnología molecular, aunque aún no se ha establecido un método definitivo de tipado molecular, debido principalmente al bajo grando de variabilidad genética de este género. Entre las distintas técnicas de tipado molecular, el RFLP utilizando como sonda la secuencia de inserción IS711, constituye un método fácil y reproducible. En este trabajo se describe la caracterización de un amplio número de aislamientos de Brucella en Cantabria, basado en este método. Se determinó especie y biovar de los diferentes aislamientos, presentando la mayoría un patrón de hibridación idéntico al de las cepas de referencia de los biovares 5,6 y 9 de B. Abortus. Si embargo el tipado convencional de dichas cepas de campo se correspondía con el del biotipo 3 de B. Abortus. Hemos detectado una mutación por pérdida de 5,4 Kb en el cromosoma de las cepas de campo tipificadas como B, abortus, que nos ha permitido el sistema de identificación de cepas mediante PCR ya existente. Se describe por primera vez la transposición de IS711 en una cepa de B, ovis y en la cepa B2/94, aislada de pinnípedos, empleando el plásmido pGBG1 que funciona como trampa de transposones.