Evaluacion del daño pulmonar en situaciones de esquemia reperfusion. Expresion tisular de arn mensajero de interleuquina 8 y su modulacion por el oxido nitrico

Resumen

EVALUACIÓN DEL DAÑO PULMONAR EN SITUACIONES DE ISQUEMIA REPERFUSIÓN. EXPRESIÓN TISULAR DE ARN DE INTERLEUQUINA 8 (IL-8) Y SU MODULACIÓN POR EL ÓXIDO NÍTRICO (NO) %&/A pesar de su mayor desarrollo y aplicabilidad, el trasplante de órganos, entre ellos el pulmonar, continúa planteando diversos retos. La isquemia reperfusión tisular, constituye un proceso inherente a las técnicas utilizadas para la realización de trasplantes en la actualidad; dicho proceso es capaz de originar una lesión celular en los órganos trasplantados, que se induce durante el periodo isquémico y se expresa tras el inicio de la repercusión como lesión tisular.%&/HIPÓTESIS DE TRABAJO:%&/La relación entre la acumulación de polimorfonucleares en el tejido pulmonar isquémico y posteriormente reperfundido y el daño tisular, es motivo de investigación, y su estudio sistemático debe plantearse en base a los agentes quimiotácticos que podrían ser las señales químicas de esta respuesta. En relación con ello nos hemos planteado la necesidad de realizar este estudio a fin de precisar las siguientes cuestiones:%&/l. Constatar la producción por el tejido pulmonar de mARN de Interleuquina 8, tanto en condiciones básales como después de distintos tiempos de isquemia. %&/2. Analizar en distintas condiciones de isquemia-reperfusión pulmonar, la sintes s de mARN de IL-8 como inductor del daño tisular causado por la infiltración de neutrófilos polimorfonucleares. %&/3. Estudiar el efecto de la modulación farmacológica del sistema NO sintasa/NO sobre la expresión de mARN de IL-8 y la acumulación de neutrófilos polimorfonucleares en el tejido pulmonar a través de dos vias:%&/a. La administración al comienzo del periodo de reperfusión de compuestos generadores de NO (Nitroprusiato sódico).%&/b. La inhibición al comienzo de la reperfusión de la producción de NO endógeno mediante la administración de inhibidores farmacológicos de la NO sintasa. %&/DISEÑO: Se utilizaron 33 conejos raza New Zeland, que fueron intervenidos quirúrgicamente de acuerdo a las normas de un protocolo establecido. Se realiza isquemia caliente, mediante clampaje del hilio pulmonar derecho siguiendo la técnica de Rummel. Asimismo, el hilio del lóbulo inferior derecho (LID) es clampado selectivamente, en este último se realizaron mediciones a distintos tiempos de isquemia mientras que los lóbulos superior y medio eran reperfundidos durante 16 2 horas tras una hora de isquemia. De acuerdo con este esquema fueron establecidos los siguientes grupos: A) Basal, extracción de tejido pulmonar tras esternotomía media sin inducción de isquemia-reperfusión; B) Isquemia reperfusión pulmonar sin modificación farmacológica; C) Reperfusión modificada mediante la administración de donantes de óxido nítrico exógeno y D) Inhibición de NO endógeno en la reperfusión pulmonar mediante la administración de L-NG-monometil arginina (L-NMMA). Instrumentos utilizados: cirugía experimental, técnicas morfológicas y estudio de la expresión cuantitativa de mARN de IL-8 por técnicas de reacción en cadena de la polimerasa (PCR).%&/RESULTADOS: El daño tisular producido por la isquemia se corresponde con una elevación rápida de los niveles de mARN de IL-8 durante la primera hora de la misma, y sus tasas permanecen elevadas a partir de dicho momento hasta la tercera hora de isquemia. Al comienzo de la reperfusión, los niveles de mARN de IL-8 se mantienen con mínimas modificaciones, progresivamente con la duración de la reperfusión se observan cambios microvasculares con un aumento del número de polimorfonucleares (PMN). La administración de donantes de NO como de L-NMMA durante la reperfusión incide en una menor expresión de estos fenómenos.%&/mARN de IL-8 Basal (Grupo A) 1 h Isquemia 2h Isquemia 3h Isquemia%&/mARN de IL-8 LID 2429 1555,02 10011,81 11007,4%&/PMN LID 3,8 3,75 3,33 4%&/ % &/mARN de IL-8 Basal (Grupo A) 1 h Isquemia lh Reperfusión 2h Reperfusión%&/Grupo B 12083%&/Grupo 2429 11555,02 10755 C 2526%&/Grupo 2429 11555,02 2157 D 910%&/PMN 2429 11555,02 %&/Grupo 964 B 13, 00%&/Grupo 3,8 3, 75 20,75 C 7, 25%&/Grupo 3,8 3, 75 8,25 D 3, 8 3, 75 5,25 3,25%&/CONCLUSIONES: Existen cambios significativos en la expresión de IL-8 durante la isquemia-reperfusión que preceden a la infiltración de PMN. La administración de donantes de NO exógeno durante la reperfusión disminuye la producción de estos fenómenos. La administración de L-NMMA al comienzo de la reperfusión se sigue del mismo efecto. La determinación de IL-8 puede ser utilizada para monitorizar el efecto en el tejido pulmonar de diferentes protocolos de daño pulmonar tras isquemia-reperfusión.