Aislamiento caracterizacion y estandarizacion biologica de un extracto de alternaria alternata

  1. FERNÁNDEZ SÁNCHEZ, FRANCISCO JAVIER

Defence university: Universidad de Valladolid

Year of defence: 1990

Committee:
  1. Sisinio de Castro del Pozo Chair
  2. Luis Corporales López Secretary
  3. José Conde Hernández Committee member
  4. Alfredo Blanco Quirós Committee member
  5. Luis Gonzalez Villaron Committee member

Type: Thesis

Teseo: 26830 DIALNET

Abstract

Se obtienen extractos de micelio-esporas, de filtrado de cultivo y mezcla de la alternaria alternata. Se valora el rendimiento obtenido por determinacion de proteinas y carbohidratos. Se caracterizan inmunologicamente por isoelectroenfoque y electroforesis en sds-page. Se determina la actividad alergenica por elisa e inmunoblotting. Y se estandariza por pruebas cutaneas (prick) y elisa-inhibicion. El estracto de micelio-espora presenta sus bandas mas notables a pi mas acido que el filtrado de cultivo, pero ambos en un rango igualmente acido. Por sds-page se identifican hasta 12 bandas de las cuales la de 15 kilodaltons se asimila al alergeno mayor de la alternaria alternata (alt-1). De 23 a 76 kd. Tambien existe actividad alergenica. El componente glicoproteico comprende el 40% de los extractos. Con el calentamiento a 70 grados en la obtencion se pierden proteinas pero no activias alergenica. Y por ultimo, en la estandcarizacion se comprueba que el estracto mezcla supera a los extractos solos. Por todo ello, el estracto mezcla de micelio-esporas mas filtrado de cultivo resulta el mejor estracto de referencia en nuestro estudio, con una buena potencia alergenica y un alto contenido en alt-1 (39%).